双光束紫外可见分光光度计的核心在于其特殊的光学设计与检测机制,旨在准确测量样品对不同波长光的吸收特性,进而分析样品成分与浓度。
仪器内部光源发出涵盖紫外及可见光范围的连续光谱,经光学系统处理后,被巧妙分割成两束强度相同、波长对应的光线,一束为参比光束,另一束则为样品光束。参比光束直接通过空白参比池,此参比池通常放置溶剂等不含待测物质的溶液,以模拟样品所处的光学环境但无吸光物质干扰;样品光束则穿过装有待测样品的样品池。当这两束光经过样品池与参比池后,由于样品中的物质对特定波长光存在吸收、散射等作用,致使样品光束强度发生变化,而参比光束强度保持相对稳定(假设参比池无吸光干扰)。
随后,两束光分别聚焦于光电探测器上,探测器将光信号转化为电信号。通过精密的电子电路与数据处理系统,对这两个电信号进行比较与运算,依据朗伯 -比尔定律(A = εlc,其中 A 为吸光度,ε 是摩尔吸光系数,l 为光程长度,c 为待测物质浓度),准确得出样品在各波长处的吸光度信息,从而绘制出吸光度随波长变化的光谱曲线,实现对样品的定性与定量分析。
双光束紫外可见分光光度计的使用注意事项:
1.环境要求:
-仪器应安装在干燥、无尘的地方,避开外部光源和震动等对测试环境产生影响,以确保测试结果的准确性和牢靠性。
-实验环境需要通风良好,有条件的地方可设置强制排气装置或在通风橱中操作仪器。
2.电源与接地:
-需要使用稳定的电源电压,工作环境附近不能有功率较大、频率启动的电气设备。接地线需要可靠接地,不能用零线代替接地线。
3.仪器维护:
-定期对仪器进行保养和维护,如清洁光学元件、更换灯泡等。
-在进行能量校准时,应使用合适的能量校准标准,确保光源强度的准确性。
4.安全操作:
-在操作过程中,注意避免强光直射样品室,以免影响测量结果。
-燃烧室与烟囱罩等高温部件在操作过程中非常烫,不能将身体凑近或者用手触摸这些地方,也不要从上而下张望。
-从废液杯里流出的排放液要集中收集,适当处理,不要随意处置。