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解析扫描型分光光度计的光吸收定律

更新时间:2019-10-28      点击次数:962
   解析扫描型分光光度计的光吸收定律
  扫描型分光光度计是将成分复杂的光分解为光谱线的科学仪器。不同的光源都有其*的发射光谱,因此可采用不同的发光体作为仪器的光源。仪器符合朗伯-比尔(Lambert-beer)光吸收定律:
  A=-lgT=εb c;
  A:吸光度,又称光密度“O.D”。
  T:透光度,T=I/I。
  I。:为照射到吸收池上的光强;
  I:为透过吸收池的光强。
  ε:摩尔吸光系数或克分子吸光系数。
  b:样品光程(cm),通常使用1.0cm的吸收地,b=1cm。
  C:样品浓度(mol/L)。
  由上式可以看出:吸光度A与物质的吸光系数“ε”和物质的浓度“C”成正比。
  摩尔吸光系数是物质对某波长的光的吸收能力的量度。ε越大,吸收光的能力越强,相应的分光度法测定的灵敏度就越高。ε值越大,说明电子跃迁的几率大,通常ε=10-105:一般认为ε>104为强吸收;ε=103-104为较强吸收;ε<102为弱吸收,此时分光光度法不灵敏。因为通常使用扫描型分光光度计可检测出的小吸光度A=0.001,所以,当b=1cm,ε=105时,可检测的溶液小浓度是C=10-8 mol/L。
  常用的吸光系数还有一种百分吸光系数,即在某一波长下,溶液浓度为1%(W/V),液层厚度b=1cm时的吸光度,以E1%λmax表示。
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