扫描型分光光度计由光源产生复合光，进入单色器后通过光栅或棱镜将光线分解为不同波长的单色光。这一过程确保了每一时刻仅有特定波长的光照射到样品上；当单色光穿透盛放于透明样品池中的被测物质时，某些波段会被选择性吸收，遵循朗伯-比尔定律(A=kbc)，即吸光度与浓度、液层厚度成正比关系；未被吸收的光抵达检测器并转化为电信号，这些模拟量经放大处理后由数据处理单元进行模数转换，生成光谱曲线；用户设定波长范围后，系统自动驱动光栅连续旋转实现全波段扫描，逐点记录各波长下的吸光度值，形成完整的吸收图谱。
扫描型分光光度计的测定步骤：
1.准备工作
-连接电源与启动软件：将仪器连接到稳定的电源上，确保电压匹配；同时检查并启动配套的光谱分析软件，确认设备间的通信正常。
-环境适配：放置于干燥、坚固平稳的工作台，避免强光直射，室内温度控制在15℃-35℃，相对湿度不超过80。
2.基线校准
-使用无吸收的空白试样覆盖样品池，调节光强至合适范围后执行“基线校准”操作，系统会记录当前光强作为后续测量的基准值。这一步可消除溶剂或比色皿本身的干扰信号。
3.样品处理与装载
-比色皿选择与清洁：选用透明且无划痕的专用比色皿，倒入待测溶液前需保证其表面洁净、无气泡。避免触碰光学面以防污染或损伤；
-浓度控制：通过适当稀释使样品浓度处于仪器线性响应范围内，防止吸光度过高导致数据失真。
4.参数设置与扫描测试
-波长选定：依据实验目的(如蛋白质选280nm、核酸选260nm)或预实验结果确定目标波长范围；
-启动扫描：放置装有样品的比色皿后点击“开始测量”，仪器自动完成全谱扫描并生成吸收光谱曲线。
5.数据处理与分析
-利用软件提取特定波长下的吸光度数值，绘制光谱图，结合标准曲线进行定量计算，解读峰位、强度等特征以推断样品成分及浓度变化。
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